PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列因此，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否要设计引物首先要找到DNA序列的保守区同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构如这个；引物设计的网站有NCBIprimer3 plusprimer 5oligo7等等3针对植物的DNA抽提试剂盒抽取样本DNA，稀释到合适的浓度备用 4扩增试剂盒对特定基因进行扩增 可以直接送PCR产物送sanger测序或者如下操作5琼脂糖凝胶跑胶，根据自己。

realtimepcr引物设计

在dna或cdna文库中找出目标基因的序列片段，在NCBI网站上搜索同源基因，挑选同源性高的序列与目标序列进行比对可以使用DNAMAN软件，找出保守区再用引物设计软件primer5或在线设计网站，通过设定参数进行引物设计~。

NewDNA Seqence然后把要设计引物的序列复制进去就行了如果你要是愿意也可以一个一个碱基的打进去，然后点Primer进入到引物设计界面，进去后选点 Search 设置相应相应的条件，如你要设计PCR扩增还是测序引物。

结合网上查阅的一些信息和TaKaRa使用说明书中的引物设计要求，同时结合文献上的论述，总结出Realtime PCR 引物设计的要求及设计步骤首先向那些以前发布信息的朋友表示感谢因为有些是引用你们的 1引物应用核酸系列保守区内。